氯霉素（chloramphenicol），是一种抗生素，化学式为C11H12Cl2N2O5，易溶于甲醇、乙醇、丙醇及乙酸乙酯，微溶于氯仿，不溶于石油醚及苯。氯霉素极稳定，其水溶液经5h煮沸也不失效。由于氯霉素分子中有2个不对称碳原子，所以氯霉素有4个光学异构体，其中只有左旋异构体具有抗菌能力。
精密称取本品适量，加甲醇适量（每10mg氯霉素加甲醇1mL）使溶解后，用流动相定量稀释制成每1mL中含0.5mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取氯霉素二醇物对照品与对硝基苯甲醛对照品适量，加甲醇适量（每10mg氯霉素二醇物加甲醇1mL）使溶解，用流动相定量稀释制成每1mL中含氯霉素二醇物5μg与对硝基苯甲醛3μg的混合溶液，作为杂质对照品溶液。照含量测定项下的色谱条件，取杂质对照品溶液10μL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使氯霉素二醇物峰的峰高约为满量程的25%，精密量取供试品溶液与杂质对照品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，含氯霉素二醇物不得过1.0%，含对硝基苯甲醛不得过0.5%。
取本品约0.5g，精密称定，置10mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品贮备液，精密量取2mL置顶空瓶中，再精密加二甲基亚砜1mL，摇匀，密封，作为供试品溶液：精密称取氯苯约36mg、乙醇约500mg，置100mL量瓶中，加二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液1mL置顶空瓶中，再精密加二甲基亚砜2mL，摇匀，密封，作为系统适用性试验溶液；精密量取对照品贮备液1mL置顶空瓶中，精密加供试品贮备液2mL，摇匀，密封，作为对照品溶液。照残留溶剂测定法（2010年版药典二部附录ⅧP第二法）测定，以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷（或极性相近）为固定液的毛细管柱为色谱柱：起始温度为40℃，维持10分钟，再以每分钟10℃的速率升至200℃，维持4分钟；进样口温度为250℃；检测器温度为300℃；顶空瓶平衡温度为85℃，平衡时间为45分钟。取系统适用性试验溶液顶空进样，洗脱顺序依次为：乙醇、氯苯，各色谱峰之间的分离度应符合要求。取对照品溶液顶空进样，计算数次连续进样结果，相对标准偏差不得过5.0%。取供试品溶液与对照溶液分别顶空进样，记录色谱图，用标准加入法以峰面积计算，均应符合规定。
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